Sulfo Cy5-N3,磺化Cy5-叠氮的标记原理与制备
食产品种类称:Sulfo Cy5-N3,磺化Cy5-叠氮的标上的基本原理与化学合成Sulfo-Cy5-N3的记号设计原理与准备1. 标识原里反响基团:Sulfo-Cy5-N3的大分子式机构中,叠氮基团用作“海洋生物正交反响方案”,Sulfo-Cy5用作“荧光汇报方案”。在使用时,叠氮基团与梦想大分子式(如DBCO遮盖的抗体阳性、炔烃遮盖的纳米技术媒介)按照点击进入物理反响共价组合,Sulfo-Cy5提拱近红外荧光电磁波。生理反应的条件:SPAAC响应迟钝(无铜):在水相加载液(如PBS,pH 7.0-7.5)中确定,在常温背光响应迟钝1-2半小时,适合于对铜比较敏感的生物工程团伙(如活上皮细胞、内部实验性)。CuAAC影响(铜促使):需添加图片铜促使剂(如CuSO₄/TBTA)和回归剂(如抗坏血酸钠),影响的条件稍复杂的,但影响传输速率快一点,适合于休外实验性。2. 化学合成根本点Sulfo-Cy5与叠氮基团的连到:Sulfo-Cy5的化学活化行式(如Sulfo-Cy5-NHS酯)可与叠氮化物淡化的胺(如叠氮乙胺)反馈,制成安全的酰胺键。反馈需要符合弱碱状况(pH 8.5-9.5)下来,在常温阴凉反馈2-4h。纯化方法:按照透析(挤占氧分子量1kDa)或抑菌凝胶滤过(如Sephadex G-25)弄掉未表现的Sulfo-Cy5或叠氮化物,保证副产物纯净度。活性酶类酶查证:标识后需检验Sulfo-Cy5的荧光特点(如放出吸光度、色度)和叠氮基团的弹窗不起作用活性酶类酶(如与DBCO绘制的BSA不起作用高效率),提高认识两种功能性均使用。暖心警告:仅使用在科学,难以使用在人身体实验英文!wyh



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