英文名称: AlexaFluor555 COOH
MF: C40H59N3O14S4
MW: 934.16
CAS: 407627-67-2
分子结构与化学特性
AF555 COOH 由 Alexa Fluor 555 荧光核心和羧酸官能团组成。Alexa Fluor 555 提供橙红色荧光,激发峰约 555 nm,发射峰约 565–570 nm,具有高量子产率、优异亮度和光稳定性。羧酸官能团能够通过化学活化(如 EDC/NHS)与含氨基的蛋白质、多肽或小分子形成稳定的酰胺键,从而实现高效共价偶联。与 NHS 酯或 Maleimide 衍生物相比,羧酸形式具有更好的化学稳定性,可在缓冲液中储存并延长使用寿命,适合长期实验需求。
光学特性
AF555 COOH 属于橙红色荧光染料,激发峰约 555 nm,发射峰约 565–570 nm。其亮度高、光漂白耐受性良好、发射谱窄,适合多通道联合检测实验。橙红色荧光在细胞及组织成像中背景自发荧光较低,有利于提高信噪比,尤其适合低浓度样品或复杂生物体系的检测。其良好的水溶性确保染料在缓冲液和生物体系中均可均匀分布,提高标记效率及实验 reproducibility。
蛋白质标记
AF555 COOH 可通过羧基活化与蛋白质的赖氨酸残基或其他官能团偶联,形成稳定的荧光标记蛋白。标记后的蛋白质可用于免疫荧光染色、Western blot、ELISA、免疫沉淀及流式细胞分析。橙红色荧光清晰、亮度高,适合低浓度蛋白的高灵敏检测。
抗体偶联
AF555 COOH 常用于抗体标记,制备荧光免疫探针或二抗。羧酸官能团可通过活化形成 NHS 酯后与抗体偶联,标记后的抗体在免疫检测中提供高信噪比信号,减少背景干扰,尤其适合多通道联合实验。
多肽和小分子标记
AF555 COOH 可与含氨基的多肽或小分子偶联,构建功能性荧光探针。其高亮度和化学稳定性保证标记探针在分子识别、酶活性检测、受体定位及药物靶点研究中的可靠性和可重复性。
活细胞及组织成像
AF555 COOH 标记的分子可用于活细胞及组织成像。橙红色荧光可与蓝色、绿色或远红色荧光染料联合使用,实现多通道多参数检测。其光稳定性保证长时间动态追踪实验的可靠性,适合蛋白质动力学、细胞器定位及分子分布研究。