CY5-biotin,CY5标记生物素的合成步骤概述
CY5-biotin,CY5标识生物工程素的合出方法流程慨述
生物素(Biotin)是一种小分子维生素,分子结构中含噻唑环、内酰胺环及羧基,能够与亲和素(Streptavidin)形成高亲和力非共价复合物。通过Cyanine 5(Cy5)标记形成Cy5-Biotin,可实现荧光示踪,用于蛋白质标记、分子识别及免疫分析。其合成步骤一般包括以下关键环节。
炼制具体步骤发展历程产甲烷生物制品素羧基生态学素的羧基是大部分表现位点,根据EDC/NHS化工化学活化导出NHS酯。实际上步凑为:将生态学素降解于适于缓存液(如碳酸盐缓存液,pH 7.5–8.5),填加EDC化学活化羧基变成O-酰基异脲上面体,再填加NHS导出安全稳定的化学活化酯。该步凑导出的生态学素-NHS酯可直接性应用于售后偶联。Cy5偶联化学反应将微海洋菌物素-NHS酯与Cy5-NH₂在温文尔雅具体条件下混合型,一般来说在恒温至25°C,决定1–4个钟头。胺基对于亲核免疫试剂进攻活力性碳,自动生成安稳酰胺键,改变微海洋菌物素与Cy5共价构建。偶联时候中可进行摩尔比保持标志符号度,尽量避免太过标志符号决定微海洋菌物素构建专业能力。现象暂停与粗纯化偶联化学反映完后,组织体制中产生未化学反映的Cy5和动物素-NHS酯。在透析、妇科凝胶滤出或蛙胶柱层析取除分离小氧分子,选择Cy5-Biotin副产物。进十步纯化高效能高效液相色谱(HPLC):利于反相C18柱,通过水-乙腈均值管理体制分开Cy5-Biotin与未想法海洋生物素及副结果。荧光的检测:在Cy5荧光电磁波要确认有机物地方,事关标识成功率。放置与在使用纯化后的Cy5-Biotin经常溶解完于PBS或合适响应液中,背光超低温手机截图。平衡性不错,可持续代替蛋白质偶联、大分子区分及荧光三维成像检测。总的Cy5-Biotin的合成通过生物素羧基活化、Cy5胺偶联、透析及HPLC纯化完成。合成步骤温和、高效,保证标记成功的同时保留生物素亲和性,为蛋白质标记、分子识别和荧光示踪实验提供可靠工具。
类产商品编码称:CY5-bioti生物学素纯净度:95%+相对性状:气体或溶液存储环境:-20°C干躁阴凉维持包装箱品种:50mg 100mg 250mg 500mg(按需给出)设备厂家:pg电子娱乐游戏app 生物体
仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.06.23


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