iFluor 680 小麦胚芽凝集素(WGA)缀合物是一种将植物凝集素与近红外荧光染料 iFluor 680 偶联的高性能分子探针。其核心成分是小麦胚芽凝集素(Wheat Germ Agglutinin, WGA),一种来源于小麦胚芽的糖结合蛋白,能够特异性识别细胞表面的 N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)和唾液酸残基。通过与 iFluor 680 荧光染料共价偶联,该探针兼具糖结合功能和近红外荧光特性,可广泛应用于细胞生物学、组织学和活体成像研究。
化学结构与性质
WGA 是由多个亚基组成的糖结合蛋白,具有高度选择性和亲和力。iFluor 680 是一种近红外荧光染料,其激发峰约在 675–680 nm,发射峰约在 700–710 nm,光谱处于生物组织光窗区域,具有低自体荧光背景和良好的组织穿透能力。通过化学偶联(通常是 WGA 上的氨基与 iFluor 680 的异硫氰酸酯或羧活性酯反应),染料与 WGA 分子形成稳定的共价连接,使探针兼具糖结合特性与稳定荧光信号。
细胞膜糖类标记与定位
iFluor 680–WGA 能特异性结合细胞膜上的 GlcNAc 和唾液酸残基,实现细胞膜糖类结构的荧光标记。在荧光显微镜下,细胞膜及连接区域的糖类分布可被清晰观察,为膜结构研究、糖蛋白分布分析及细胞间相互作用研究提供可靠工具。
细胞内吞与动态运输研究
WGA 可被细胞内吞,因此 iFluor 680–WGA 可用于追踪细胞内囊泡运输、内吞途径及膜翻转过程。荧光信号随时间和空间变化,为膜动力学、信号传导及细胞代谢研究提供直观数据。
流式细胞术与高通量分析
在流式细胞术中,iFluor 680–WGA 可用于检测细胞表面糖类结构、分析细胞状态及群体异质性。其近红外发射光谱与常规绿色或红色荧光染料兼容,使多参数流式分析和复杂实验设计成为可能。