FITC-Folate 是一种将叶酸(Folate, Vitamin B9)与荧光异硫氰酸荧光素(FITC, Fluorescein isothiocyanate)偶联的分子探针。叶酸能够高特异性结合细胞表面的叶酸受体(Folate Receptor, FR),而 FITC 提供绿色荧光信号(激发约 490 nm,发射约 520 nm),因此 FITC-Folate 常用于细胞标记、受体成像及靶向探针研究。
化学结构与性质
叶酸部分:通过叶酸的羧基或氨基进行化学修饰,保留其对叶酸受体的高亲和力。
FITC 染料:异硫氰酸荧光素提供绿色荧光,光学性能稳定,适合多色荧光实验。
共价偶联:FITC 的异硫氰酸酯基团与叶酸的氨基形成稳定的硫代脲键,实现可靠标记。
水溶性:FITC-Folate 可溶于缓冲液中,用于细胞和组织实验。
功能特点
高亲和力结合叶酸受体:FITC-Folate 能选择性标记 FR 高表达的细胞,如癌细胞或某些免疫细胞。
绿色荧光可视化:FITC 提供强亮绿色荧光,适合荧光显微镜和流式细胞分析。
特异性标记:结合叶酸受体实现低背景、高信噪比的靶向标记。
温和反应条件:适用于细胞培养体系,无需破坏细胞结构。
应用领域
细胞膜受体标记:用于标记叶酸受体高表达细胞,实现荧光可视化和定量分析。
流式细胞分析:通过绿色荧光检测受体表达水平和细胞分类。
受体介导的内化研究:用于观察叶酸受体介导的胞吞过程和靶向药物传递研究。
多色荧光实验:FITC 的绿色信号可与红光或蓝光荧光探针组合,实现多色标记实验。
使用与注意事项
溶解与配制:FITC-Folate 可溶于 PBS 或 HEPES 缓冲液中,避光使用。
储存:低温避光保存(2–8℃短期或 −20℃长期),保持荧光稳定性。
孵育条件:细胞实验中需控制浓度和时间,避免非特异性吸附和细胞应激。
多色实验兼容性:与其他荧光染料组合时需注意光谱重叠和滤光片选择。