BDP TR NHS Ester 是一种基于硼二吡咯(BODIPY)荧光染料的活性酯衍生物。BODIPY 染料以其高荧光量子产率、窄发射光谱和良好的光稳定性著称,而 NHS 酯(N-羟基琥珀酰亚胺酯)活性基团则使其能够在温和条件下与蛋白质、肽或其他含氨基的分子高效共价偶联,从而实现荧光标记。BDP TR NHS Ester 的发射波长位于红光区域(激发约 590 nm,发射约 615 nm),适合多色荧光实验和活细胞成像。
化学结构与性质
BODIPY 核心:提供红光荧光,光稳定性强,亮度高。
NHS 酯活性基团:末端可与蛋白质或肽的赖氨酸残基的氨基反应,形成稳定的酰胺键,实现共价标记。
疏水性与水溶性:BDP TR 染料略带疏水性,通常溶于 DMSO 或 DMF 等有机溶剂中,反应后可在水相体系中使用。
光学性能稳定:在缓冲体系和生物体系中均具有良好的荧光信号和光稳定性。
功能特点
红光荧光信号:发射波长 615 nm,减少自体荧光干扰,适合多色标记实验。
高效共价标记:NHS 酯可快速与蛋白或肽分子形成稳定酰胺键,标记效率高。
光稳定性强:适合长时间荧光成像或定量分析。
温和反应条件:可在 pH 7–9 的缓冲液中进行标记,不破坏蛋白或细胞结构。
应用领域
蛋白质与肽标记:用于制备红光荧光探针,实现蛋白追踪、定位和定量分析。
活细胞成像:红光激发可降低自体荧光干扰,适用于共聚焦显微镜和超分辨显微镜。
多色荧光实验:与绿色、蓝色或紫色荧光染料组合,实现多通道成像。
生物分子功能研究:可用于标记抗体、受体或其他靶蛋白,构建荧光探针体系。
使用与注意事项
溶解与反应条件:通常先溶解于干燥有机溶剂(DMSO/DMF),然后加入缓冲体系进行标记。
储存:避光、低温(−20℃)干燥保存,防止光降解。
标记效率:需根据蛋白浓度和 N:protein 摩尔比优化,以获得高效标记。
非特异性结合:染料疏水性可能引起非特异性结合,可通过优化缓冲和洗涤条件降低干扰。