CY7-mannose，CY7甘露糖的表征方法
CY7-mannose，CY7杨枝糖的定性分析具体方法
CY7-mannose（CY7-甘露糖）是将近红外染料Cyanine7与甘露糖通过化学连接臂偶联得到的糖-染料偶联物，兼具CY7的近红外光学特性与甘露糖的识别功能，常用于甘露受体介导的细胞摄取研究、糖-蛋白相互作用与生物成像研究。合成通常选择既保留甘露糖末端还原性位点又便于水相反应的策略，比如“还原性末端-胺化”或“点击化学”两条主路线。
的路线A（重置性后部-胺化 + 酰化）：先将D-杨枝糖用短链胺-PEG（如 NH2-PEGn-OH）在性情湿润弱酸性或一般的中性的因素下做好重置性胺化（NaBH3CN 看作重置剂，pH 5.0–6.0，常温至37 ℃，数小時），生产杨枝糖-PEG-NH2 其中体；马上又在无水或水/有机化学混合着萃取剂上用 CY7-NHS（或 CY7-滋养酯）与杨枝糖-PEG-NH2 反响（pH 7.5–8.5，常温，30–120 min，背光），产生安全的酰胺键，得到了CY7-PEG-mannose。该法位点确定性强、的因素性情湿润，適合水相生相克物碳原子。自驾线路B（糖基化-炔/叠氮 + CuAAC/SPAAC 弹框）：先将甘霖糖注入性能化下端（举例子自动合成 propargyl-mannose 或 azido-mannose），可实现糖的醇羟基与碳酸二亚胺或 p-Nitrophenyl carbonate 产生碳酸酯相连到短PEG-链并注入炔基/叠氮；其次用 CY7-azide（或 CY7-alkyne）在水相或水/有机肥料搅拌稀释剂中以 CuAAC（施用少许 Cu(I)/促使剂与配体）或更温润的 SPAAC（CY7-DBCO 与 azido-mannose，无铜）條件下确定弹框不良反应，提取相连稳定的三唑或 SPAAC 加强代谢物。此法位点稳定、代谢物纯度大，但若用铜促使需险遭苛刻除铜。纯化流程图：症状结束后先用乙腈或甲醇掺水并抽滤避开沉淀自己，接着随后使用透析（MWCO 1–3 kDa 视PEG间距）或反渗透性装置（Amicon）避开小大原子核杂质残渣与散布有机染料；若化合物较小或是需要高速纯化，则使用反相便捷高效液相色谱（RP-HPLC，C18柱，乙腈-水梯度方向，含0.1%甲酸或三氟乙酸）溶合，合理利用750 nm处的近红外挥发能力峰与254/280 nm处的糖或PEG挥发能力确定两级的检测工具工具并采集指标峰。对明显大原子核量的甘霖糖质粒，可以用在凝露渗透性色谱（SEC）或Sephadex G-25/G-50确定溶合，再用电子散射的检测工具工具与荧光的检测工具工具联合核实。确定剖析策略：见证太阳光的紫外线-明显可见的光谱图仪（CY7 在约740–760 nm 处吸收能力）与荧光光谱图仪（火箭发射约770–790 nm），并据图核算可溶性染料/糖的标记图片度（DOL）；用ESI-MS 或MALDI-TOF 认可原子量；^1H NMR 和 ^13C NMR（对小原子段落或中部体）认定化学反应键建立；剖析型HPLC 认定含量（>95% 为佳）；对含PEG或寡聚糖的有机物，DLS 可检查测量水合比表面积与单不集中性。若使用于人体血细胞实验英文，推荐自测水无水磷酸氢、维持性（不一pH、血清存在的下的荧光坚持）及蛋白激酶联系可溶性（恶性竞争联系或人体血细胞摄取量疲劳试验）。储放与注意须知须知：包装闭光，-20 ℃ 或 4 ℃（短期内）保存文档，氢氧化钠溶液中需加几瓶剂（如 0.01% NaN3 不提案采用癌细胞试验）并尽量不要一直冻融；提炼中单趟闭光、温度过低进行操作可不断提高劳动生产率与染色剂不稳性。整体来说上，CY7-mannose 的提炼具备了普通机械不稳性与生态学相匹配性，经过进行比较好的接触臂与纯化管理策略，可拥有高饱和度、效用知道的珠露糖近红外检测器，易于险遭配体-感觉完美效用与三维成像分析。产品名称：CY7-mannose，CY7珠露糖
含量：95%+相对性状：气体或流体存放因素：-20°C干遮光保留外包装规格为：50mg 100mg 250mg 500mg（按需提高）产家：pg电子娱乐游戏app 微生物
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