CY7-mannose,CY7甘露糖的表征方法
CY7-mannose,CY7甘霖糖的研究形式形式
CY7-mannose(CY7-甘露糖)是将近红外染料Cyanine7与甘露糖通过化学连接臂偶联得到的糖-染料偶联物,兼具CY7的近红外光学特性与甘露糖的识别功能,常用于甘露受体介导的细胞摄取研究、糖-蛋白相互作用与生物成像研究。合成通常选择既保留甘露糖末端还原性位点又便于水相反应的策略,比如“还原性末端-胺化”或“点击化学”两条主路线。
交通路线A(展现性尾部-胺化 + 酰化):先将D-珠露糖用短链胺-PEG(如 NH2-PEGn-OH)在平稳弱酸性或中性化生活先决条件下采取展现性胺化(NaBH3CN 用于展现剂,pH 5.0–6.0,室内温度至37 ℃,数h),绘制珠露糖-PEG-NH2 中部体;其次在无水或水/生产交织容剂用得 CY7-NHS(或 CY7-碱化酯)与珠露糖-PEG-NH2 表现(pH 7.5–8.5,室内温度,30–120 min,背光),型成动态平衡的酰胺键,取到CY7-PEG-mannose。该法位点选购性好、生活先决条件平稳,适于水五行相生物原子。路线地图B(糖基化-炔/叠氮 + CuAAC/SPAAC 点开):先将甘霖糖导致性能化终端(举例子提炼 propargyl-mannose 或 azido-mannose),可借助糖的醇羟基与碳酸二亚胺或 p-Nitrophenyl carbonate 导致碳酸酯联接到短PEG-链并导致炔基/叠氮;最后用 CY7-azide(或 CY7-alkyne)在水相或水/有机酸混合着稀释剂中以 CuAAC(运行少量出 Cu(I)/催化反应氧化剂与配体)或更温顺的 SPAAC(CY7-DBCO 与 azido-mannose,无铜)具体条件下通过点开反應,转换联接结实牢固的三唑或 SPAAC 增加乙酰乙酸。此法位点可控性、乙酰乙酸纯高,但若用铜催化反应氧化需以后严格执行除铜。纯化操作流程:化学反应实现后先用乙腈或甲醇希释并离心法我们要除沉淀自己,紧接着根据透析(MWCO 1–3 kDa 视PEG段长度)或反浸入装置(Amicon)我们要除小团伙残渣与矿酸染色剂;若代谢物较小或需层面纯化,则根据反相高色谱仪色谱(RP-HPLC,C18柱,乙腈-水梯度方向,含0.1%甲酸或三氟乙酸)转移,根据750 nm处的近红外汲取峰与254/280 nm处的糖或PEG汲取对其使用选择性探测并处理梦想峰。对最大团伙量的珠露糖媒体,该用妇科凝胶浸入色谱(SEC)或Sephadex G-25/G-50对其使用转移,同用散发出探测与荧光探测主体验证。相关性数据分析方式方法:记录时间紫外线-内见光谱图仪(CY7 在约740–760 nm 处释放)与荧光光谱图仪(反射约770–790 nm),并据图计算染剂/糖的标示度(DOL);用ESI-MS 或MALDI-TOF 安全验证氧分子式量;^1H NMR 和 ^13C NMR(对小氧分子式场面描写或后面体)明确电学键养成;数据分析型HPLC 明确溶解度(>95% 为佳);对含PEG或寡聚糖的副产物,DLS 可加测水合颗粒直径与单散落性。若适用于细胞系系实验操作,最好是测验水可溶、平衡性(差异pH、血清长期存在下的荧光实现)及蛋白激酶融入渗透性(恶性竞争融入或细胞系系摄取量检验)。存放与要注意事由:预包装背光,-20 ℃ 或 4 ℃(预期)存为,液体中能加少量的剂(如 0.01% NaN3 不建意用以细胞核进行实验)并预防频繁冻融;自动合成图片中全流程背光、常温工作可提高了劳动生产率与纺织染料稳固可靠性。总体性上,CY7-mannose 的自动合成图片发挥了无机化学稳固可靠性与海洋生物相融性,能够 选泽合适的的对接臂与纯化策咯,可获得了高纯净度、效用厘清的珠露糖近红外检测器,更好地后继配体-肾上腺素受体双方效用与影像论述。产品名称:CY7-mannose,CY7珠露糖
溶解度:95%+物理性质:气体或粘液永久保存先决条件:-20°C干涩闭光永久保存标签印刷型号规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需供应)产家:pg电子娱乐游戏app 微生物


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