Cy7-Dibenzylcyclooctyne，CY7标示二苄基环辛炔的合成视频自驾路线

Cy7-DBCO为近红外荧光素（Cyanine7 类）与二苄基环辛炔（DBCO, 常写作 dibenzocyclooctyne）通过稳定酰胺键或聚乙二醇（PEG）桥连接的共轭分子。Cy7 提供 740–770 nm 吸收、约 770–800 nm 发射，适合体内/深层成像与共聚焦观察；DBCO 则是铜自由点击（SPAAC）反应的典型环炔基，可与叠氮基（azide）在温和条件下高选择性地耦合，用作后续生物正交标记。将两者结合得到的 Cy7-DBCO 既保留了 NIR 发光特性，又赋予分子与叠氮化物配体的“可点火”功能，适用于标记叠氮化修饰的蛋白、寡核苷酸、糖类或材料表面以实现荧光示踪与后续点对点偶联。分子设计中常加入短 PEG 链（PEG2–PEG8）以提高水溶性、降低疏水聚集和减少非特异性结合。典型目标物理性质：分子量 900–2000 Da（视 PEG 长度与 Cy7 衍生物而定），紫外-可见/荧光光谱和 RP-HPLC 保留时间为主要表征指标。

结合视频途径（安利途径 A：便捷性配用；并根据途径 B：如要自结合视频 DBCO 的概览）途径 A（推见，根据做园作用制剂） — Cy7-NHS 与 DBCO-PEG_n-NH2 偶联实验试剂与萃取剂：Cy7-NHS (或 Cy7-succinimidyl ester，1.05 eq)，DBCO-PEG4-NH2（或 DBCO-PEG2/PEG8-NH2，1.0 eq），无水 DMF 或 DMSO，碳酸氢盐保护或进样器生产胺（是碱性的能力），N2 惰性课堂气氛，阴凉控制。融化：在晾干、阴凉必要条件下，对应将 Cy7-NHS 不能溶解少许无水 DMF，将 DBCO-PEG-NH2 不能溶解 DMF/0.1 M 碳酸氢盐缓冲区（pH 8.3）混合法盐溶液，狠抓总体布局有机化学相不已超 30–40%。偶联不起作用：将 Cy7-NHS 稀硫酸在 0–25 °C 下相对比较缓慢申请加入 DBCO-稀硫酸，搅拌机 1–3 小的时候（室内高温常已经可以），实现 TLC 或 概述 HPLC 监管不起作用（Cy7 吸纳峰处的峰消长）。如需要加速，可将高温维护在 30 °C 下述防范染剂光降解。结束与补救：不良反应达成后申请加入中毒甘氨酸或工业乙醇胺（≈5 eq）淬灭残留 NHS 酯，稀释溶解后以去正离子水/乙腈为流失相进行半制作 C18 RP-HPLC（均值 5→70% 乙腈 + 0.1% TFA），隔离主结果。纯化与常温、干燥：抽取主峰、冻干取到 Cy7-DBCO（常常得率 40–75%，在于于始点物与操作步骤）。定量分析：HR-ESI-MS（判定原子核量）、^1H NMR（若样品管理溶液浓度能）、UV-Vis（记录好 λ_max）、荧光光谱仪、RP-HPLC（色度）与 DLS（监测涌入）。放置：灌装于深棕色安瓿，-20 °C 微冻非常干燥存有；盐溶液态 4 °C 背光而短时间内存有。防范太阳光、强酸性/强碱性及长久生产萃取剂中存有防范染色剂裂解。规划 B（如要自合成图片 DBCO 骨架） — 概览合成图片 dibenzocyclooctyne 骨架一般从二苯甲基所代替的环辛烯前体刚刚开始，有芳基形成、制做化学式操控与脱氢/环化流程；典型路线规划以及从相对应二苯基环辛烷前体脱氢或可以通过金属质促使的环化来创造出一个八元环的力值环炔体系中。分解成的 DBCO 进一点经羧酸/氨基性能化（比如获取短 PEG 链并终端改建为胺或羧），便以后与 Cy7-NHS 或带羧基的 Cy7 使用 EDC/NHS 或纯化酯偶联。该途径包含多步可挥发合并、严格要求的无水/惰性氛围音乐操作方法与偶联里面体的色谱分离处理，岗位量与高风险可观远远超出途径 A，一般来说仅在业务微生物培养基不能得或需特色代替基时选取。目光方式方法与线质量调节染剂与 DBCO 都对光、热神经敏感：一趟遮光、要尽可能的常温操作方法。把控好标上度（1:1 为优）以降低多代替以至于的光学仪器淬灭。用 RP-HPLC 安全查证多元化峰与高溶解度；用 HRMS 安全查证精确性原子核量。通过水相偶联前，评诂融解性并注重 PEG 链高度对水可溶与反應传输速率的损害。

产品名称：Cy7-Dibenzylcyclooctyne，CY7记号二苄基环辛炔

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