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CY7-reactive-protein,CY7标记反应蛋白的反应机理
发布时间:2025-09-03     作者:axc   分享到:
CY7-reactive-protein,CY7记号响应蛋白质的响应原理

CY7-reactive-protein 指通过共价键将近红外荧光染料 CY7 与蛋白质偶联的荧光探针。常见的标记策略是利用蛋白表面存在的亲核基团(赖氨酸残基上的 ε-氨基,或半胱氨酸残基上的巯基)与活化的 Cy7 衍生物(如 Cy7-NHS 酯、Cy7-马来酰亚胺、Cy7-DBCO 等)发生特异反应。这样得到的 CY7-蛋白共轭物不仅保持了蛋白的结构与功能,还具备近红外成像能力。该类荧光标记蛋白应用于细胞膜受体成像、蛋白运输研究、分子相互作用检测以及生物正交化学体系中的探针设计。由于 CY7 信号穿透深、背景低,因此特别适合在活体条件下进行蛋白动态追踪。表征方法包括 SDS-PAGE 荧光检测、紫外-可见吸收(A280 与 A750 校正计算标记度)、质谱与功能学实验。

化学反应原理赖氨酸箭头(NHS 酯手段)CY7-NHS 酯在偏碱因素下(pH 8.3–8.6)可被球蛋白外观的赖氨酸 ε-氨基或 N-端氨基普通攻击。差向异构为:氨基的孤对光电打击 产甲烷的羧酸酯羰基,型成周围体中间的体,进而挥发释放 NHS 阴离子,合成保持稳定的酰胺键。长处:运营便捷,适于于大部分球蛋白。缺陷:标上位点不仅仅,高发生单点绘制,决定球蛋白生物。半胱氨酸箭头(马来酰亚胺路经)CY7-马来酰亚胺可与蛋白质中的巯基能够 Michael 增加发应共价构建。差向异构为:半胱氨酸巯基在中性粒细胞–弱含碱经济条件下(pH 6.5–7.5)要素解离成硫负亚铁离子,进军马来酰亚胺双键的 β-位碳,变成安稳的硫醚键。特征:进行高朝,只标签显示的半胱氨酸。弱项:依耐球蛋白半胱氨酸总数与面积部位。微生物正交图标(SPAAC 或 IEDDA)若核蛋白先顺利通过遗传性识别码或有机化学掩盖引进叠氮基(–N3)或四嗪基团,可利用 Cy7-DBCO 或 Cy7-四嗪来进行铜自由自在点一下反應。SPAAC(应力应变促使叠氮-炔环加强):DBCO 高表面张力环炔与叠氮基自发性环加强,造成 1,2,3-三氮唑共价键。IEDDA(逆手机需要量狄尔斯–阿尔德):四嗪与力值二烯烃(如 TCO)更快的偶联。好处:条件性超高,对氨基残基无电磁波辐射,很大更适合活体标记图片。综上分析一下CY7-reactive-protein 的不起作用不可逆性本身是运用 CY7 发展物上的可溶性官能团与淀粉酶质常見官能团内的共价不起作用。NHS 酯–胺酰胺化是常見政策,适当几乎数淀粉酶;马来酰亚胺–巯基不起作用保证高选定 性;而 SPAAC 与 IEDDA 不起作用是了先进的的菌物正交标签措施,采主要用于人体内条件。选定 哪类标签措施需表明淀粉酶本质、制定目标使用和需求位点选定 性来定。

产品名称:CY7-reactive-protein,CY7图标现象核蛋白

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