AF350 NHS 是一种高性能的荧光标记试剂,属于 Alexa Fluor 系列染料之一。该试剂广泛应用于生物分子标记、蛋白质修饰、抗体标记、核酸标记以及多重荧光分析实验中。Alexa Fluor 350 的主要光学特性为吸收波长约为 346 nm,发射波长约为 442 nm,呈现亮蓝色荧光。
化学结构与性质
AF350 NHS 是通过 Alexa Fluor 350 荧光染料与 N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化酯结合形成的化合物。NHS 酯是一种常用的活性基团,可与生物分子上的自由氨基(主要为赖氨酸残基或蛋白质 N 端)共价结合,从而实现稳定的荧光标记。这种共价修饰方式确保了标记的稳定性和持久性,同时减少非特异性结合。AF350 NHS 化学性质稳定,可冻干长期储存,且在水、缓冲液或有机溶剂中均具有良好溶解性,便于在不同实验条件下使用。
应用原理
AF350 NHS 的标记原理基于 NHS 酯与目标分子上的氨基的化学反应。在适当的缓冲条件(通常为 pH 7–9 的碳酸盐缓冲液或磷酸盐缓冲液)下,NHS 酯活化的羧基会与氨基发生亲核反应,生成稳定的酰胺键,从而将 AF350 荧光染料共价连接到目标分子上。该方法适用于蛋白质、肽、抗体、核酸以及其他含有游离氨基的生物分子。AF350 的蓝色荧光发射与绿色、红色或远红色荧光染料分光清晰,因此非常适合多重荧光标记实验。
竞争优势与共同点高亮显示度橙色荧光:AF350 卫星发射晶莹橙色荧光,最合适在荧光显微镜、多光谱浅析三维成像相应普鲁士蓝染色神经元浅析中施用。高光粉稳定量分析性:既然在长時间了解或总是激活具体条件下,荧光数字信号衰减很慢,绝对实验设计反复性。物理安全保持稳定量分析强:冻干放置前提条件下长期性的安全保持稳定,重溶后可在十分降低液中短时间导出。高特男人:NHS 酯产甲烷的羧基仅与氨基发生了反响,标记符号透亮、可信,背静低。众多图标兼容性设置:蓝翠绿色荧光与普遍的翠绿色、橙大红色、远橙大红色荧光有机染料光谱分析分开优异,可进行多目的共手机定位设计。
使用注意事项
AF350 NHS 应储存在低温避光条件下,避免水分和高温环境,以防活性丧失。标记反应需在适当 pH 条件下进行,以确保 NHS 酯高效反应并形成稳定的酰胺键。实验中应避免强酸或强碱条件,因为极端 pH 会降低反应效率。

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