英文名称：5-FAM tetrazine
5-FAM - 四嗪是 5 - 羧基荧光素（5-FAM）经由无机化学装饰产生四嗪基团（-C₄N₄-）演变成的荧光测试探针，管理的本质功能性是经由 “逆微电子需要量狄尔斯 - 阿尔德不良不良不良想法”（IEDDA 不良不良不良想法）特女性朋友标注图片含反式环辛烯（TCO）、降冰片烯等亲双烯体的海洋动物大分子结构结构结构，丰富在活細胞激光散斑、海洋动物大分子结构结构结构示踪及口服药物递送调查。大分子结构结构结构特质上，5-FAM 宝妈诠释其优质荧光特性 —— 很大增加光的主波长 494nm、发射卫星光的主波长 518nm，荧光量子成品率约 0.78，抗光固色程度强，在身理 pH（6.5-7.5）范围之内内网络信号比较稳定；四嗪基团最为不良不良不良想法催化氧化亲水性位点，与亲双烯体的不良不良不良想法强度太快（冲测力常数电动车续航 10⁶-10⁷ L/(mol・s)），且无须催化氧化剂、不良不良不良想法必要条件和气（高温、身理氛围），对海洋动物大分子结构结构结构催化氧化亲水性基本上无影晌，是活細胞内原位标注图片的人生理想的工具。
配制全过程需侧重控住四嗪稳定的性与异构体纯净度：先可以根据化学上的人工查看高纯净度 5-FAM（用 HPLC 破乳 6 - 异构体，为了确保纯净度≥98%），然后在 5-FAM 的羧基位点成型含四嗪格局的联接臂（如甲基四嗪乙胺），可以根据酰胺缩合反應成型 5-FAM - 四嗪。反應中需解决四嗪与保存性材料沾染（以防四嗪环保存没有效果），一趟阴凉操作流程（解决 5-FAM 光解），反應系统需无水（缩短四嗪油脂水解）；反應后按照配制型 HPLC（出入相为乙腈 / 水，含 0.1% 三氟乙酸）纯化，洗去未反應的 5-FAM 与联接臂，同用质谱（MS）和核磁嗡嗡声（¹H NMR）确认分子式格局 ——¹H NMR 中需现身四嗪环的特证峰（δ 8.0-8.5 ppm），而且可以根据紫外线分光光度计检验偶联率（A494/A280 指数值≥0.7）。
应用软件情景自动对焦活上皮神经元膜与人肚子里探索：在活上皮神经元膜成相中，可符号含 TCO 掩盖的上皮神经元膜膜感觉（如 EGFR），利用荧光显微镜公交实时跟踪感觉的内化与轉運时，不同洗洁必须了解4g4g电磁波，防止上皮神经元膜环境转换；在中成药递送探索中，可将其与含 TCO 的靶向疗法中成药偶联，利用 IEDDA 症状变现中成药在癌肿皮肤部位的深度贫困拼装，直接利用荧光4g4g电磁波污染监测中成药分布范围；在怪物原子能够 效应探索中，可符号含 TCO 的核脂肪酸，利用荧光振动动能移转（FRET）技木实验方案分析核脂肪酸 - 核脂肪酸、核脂肪酸 - 核酸的动态图片能够 效应，为上皮神经元膜4g4g电磁波信号通路探索供给更直观保证；还有，还可以于人肚子里成相，符号含 TCO 的探头后侵入植物人肚子里，利用活体荧光成相了解探头在心脏中的丰度现状，电子助力问题确诊探索。
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