5-FAM Me-tetrazine（CAS 号 1619222-85-3，5 - 羧基荧光素甲基四嗪）是 5-FAM - 四嗪的甲基转变成衍生产品物，主导胜机最为甲基淡化加强了四嗪基团的可靠安稳性分析性（减轻水解症状频率），与此同时永久保存极有效率 IEDDA 症状怪物，应应用在长时程怪物原子核示踪、活体三维成像及多符号實驗。原子核优点上，其荧光耐热性与 5-FAM 不同 ——494nm 提高、518nm 散发，荧光量子成品率约 0.77，且甲基的获取未影响荧光团的光学元件优点；甲基四嗪基团与 TCO 的症状频率虽稍低一些于普通的四嗪（约 10⁵-10⁶ L/(mol・s)），但可靠安稳性分析性差异性升降（在内分泌系统抗震液中半衰期延长至至 24 每几小时上文内容），更比较合适需长的时间孵育的實驗（如上皮细胞培养出 72 每几小时上文内容的跟踪）。
离心分离纯化的过程 需侧重甲基四嗪接入与产品色度：以 5-FAM 为原辅料，选购含甲基四嗪机构的无线连接臂（如甲基四嗪丙胺），可以用 EDC/DMAP 催化表现的酰胺缩合表现偶联。表现工作温控在制冷（25℃），表现时间间隔 2-4 钟头，防止低温使得甲基四嗪转化；纯化时间段采用了反相 HPLC，严厉管控过柱等度，以保证离心分离消除 6 - 异构体与未表现原辅料；产品需可以用科学规范高效液相色谱 - 质谱联用（HPLC-MS）安全验证色度（≥98%），并可以用安全稳定量分析测试仪（37℃人体生理缓解液中孵育 24 钟头，荧光比强度继承率≥90%）以保证特性。
应用软件上更适当长时程与多标出探讨：在干组织搜寻中，可标出含 TCO 的干组织，进行荧光成相按照观察干组织在节肢动物身身上 7 天以内的定植与细分工作，甲基四嗪的安稳性逃避了查测器太快不可以使用；在多色成相中，因而荧光手机信号灯与别颜料（如 Cy3、Cy5）无从叠，可与别 IEDDA 查测器（如 Cy3-TCO）结合，实行同一时间组织内俩种菌物原子的同样示踪；在制剂基础排泄探讨中，可标出含 TCO 的制剂原子，进行荧光查测讲解制剂在身身上 24 小的时候内的基础排泄速度与处理路径分析，为制剂半衰期评定出具参数；因此，还可以使用于特定组织的免疫性荧光探讨，甲基四嗪的安稳性抓好了探讨工作中手机信号灯长久不衰减，提升结杲连续性。
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