英文名称:5-FAM Maleimide
5-FAM Maleimide 是 5 - 羧基荧光素掩盖马来酰亚胺基团(-C₄H₂O₂N-)确立的荧光测试探针,层面作用是活力聊天箭头含分散巯基(-SH)的动物原子核(如血清质、多肽、抗原),常见于血清质组学、抗原箭头及组织细胞走势肌肉收缩深入分析。原子核特征参数上,5-FAM 的荧光耐磨性安稳 ——494nm 抑制、518nm 导弹,荧光量子劳动生产率约 0.79,马来酰亚胺基团对巯基的表现活力聊天特别高,在 pH6.0-7.0 前提条件下可与 - SH 加快确立安稳的硫醚键(表现原因学常数约 10⁴ L/(mol・s)),且不与氨基、羟基等其他的官能团表现;一同,马来酰亚胺基社团积小,箭头后对动物原子核的空间区域架构与活力后果小,需要最合适抗原、酶等活力血清的箭头。
制取环节需控制马来酰亚胺活性酶与巯基骚扰:一方面纯化 5-FAM(HPLC 转移 6 - 异构体,饱和度≥98%),在其羧基位点与含马来酰亚胺的联系臂(如 N-(2 - 氨基乙基) 马来酰亚胺)实现酰胺缩合想法偶联。想法需要在无水状况下进行(以以防马来酰亚胺水解体现),全部背光(以防 5-FAM 光解),且想法模式需增添重合金螯合剂(如 EDTA),以以防重合金阳离子离子液体巯基腐蚀;纯化用凝胶的作用活性炭过滤层析(Sephadex G-25)取除游离于小原子,使用太阳光的紫外线分光光度计测量偶联吸收率(A494/A280 比率 0.5-0.8 为适宜),确保安全生产每原子氨基酸质标志 3-5 个荧光探头(以防引致过度标志引致荧光淬灭)。
使用场景中聚焦在巯基动物技术团伙符号:在抵抗能力阳性符号中,可采用还原系统抵抗能力阳性门铰链区的二硫键绘制矿酸巯基,再与 5-FAM Maleimide 化学反应,制得荧光符号抵抗能力阳性,广泛用于免疫系统荧光论文检侧 —— 如符号抗 CD3 抵抗能力阳性,论文检侧 T 人体受损生殖内部膜外表面 CD3 团伙的体现;在蛋清质组学探索探索分析中,可符号人体受损生殖内部膜裂解液中的含巯基蛋清质,采用荧光二维妇科凝胶电泳(2D-DIGE)分割,探索分析其他人体生理模式下人体受损生殖内部膜内巯基蛋清的体现不同,助力器被氧化应激性相关联皮肤疾病探索探索分析;在人体受损生殖内部膜无线走势减压反射中,可符号含巯基的无线走势蛋清(如 Ras 蛋清),采用荧光显微镜观察分析其在人体受损生殖内部膜内的wifi定位波动,探索探索分析无线走势信号通路的启用进程;还有,还可广泛用于多肽食用的药物符号,符号含巯基的改善性多肽(如发育抑素),跟踪多肽在动物自身的机构划分,评价指标其动物技术采用度。
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