FITC-Bovine Serum Albumin,荧光素标记牛血清白蛋白
服务英文名称:FITC-Bovine Serum Albumin,荧光素标示牛血纯洁血清物品详细介绍:
结构特点
FITC-BSA 是通过异硫氰酸荧光素(FITC)共价修饰牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin, BSA)形成的荧光标记蛋白。BSA是一种分子量约为66 kDa的单链球状蛋白,含有丰富的赖氨酸残基和半胱氨酸残基,其结构稳定、溶解性好。FITC是一种异硫氰酸基小分子荧光染料,能够与蛋白中的氨基基团形成稳定的共价键。标记后的BSA保持了原有的空间构象,同时获得荧光信号,其激发波长约为495 nm,发射波长约为519 nm。荧光强度随FITC与BSA的标记比例、溶液pH值及缓冲体系而变化,通常在碱性条件下进行标记以保证高效反应。
化学反应与制备
FITC通过异硫氰酸基与BSA的赖氨酸氨基形成稳定的thiourea键。这一过程通常在pH 8.0~9.0的缓冲体系中进行,以促进氨基去质子化,提高反应活性。标记过程中需要控制FITC与BSA的摩尔比,以获得适度的荧光强度同时避免蛋白质构象改变。反应完成后,常用透析或凝胶过滤去除未结合的FITC,得到纯化的FITC-BSA。
应用范围
FITC-BSA作为经典的荧光标记蛋白,在生物学和化学研究中具有广泛应用:
免疫学研究:可作为荧光标记的抗原或结合蛋白,用于免疫印迹(免疫荧光Western blot)、流式细胞术(Flow Cytometry)等分析。
生物成像:FITC-BSA可用于细胞摄取、蛋白质分布及组织切片标记,观察蛋白质在细胞或组织内的动态。
受体配体研究:FITC-BSA能够模拟大分子配体,与细胞表面受体结合后,通过荧光信号定量结合能力。
膜通透性与内吞研究:利用其水溶性和荧光特性研究物质跨膜运输及内吞机制。
标准品和标记对照:在荧光定量实验中作为标准荧光蛋白,用于仪器校准或信号对照。



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