链霉亲和素-CF633结合物的化学偶联与制备
护肤公司名称称:链霉亲和素-CF633整合物好产品简单介绍:
结构特点
链霉亲和素(Streptavidin)是一种从链霉菌中提取得到的四聚体蛋白,每个亚基约为15 kDa,总分子量约60 kDa。其具有高度特异的生物素结合位点,每个亚基可结合一个生物素分子,结合亲和力*高(Kd ~10^-14 M),形成稳定的非共价复合物。CF633是一种红色荧光染料,激发波长约为630 nm,发射波长约为650 nm,具有高荧光量子产率和优良的光稳定性。通过化学偶联方法,CF633与链霉亲和素的赖氨酸残基共价结合,形成荧光标记的链霉亲和素。
化学偶联与制备
CF633通常带有活性酯或NHS酯官能团,可与链霉亲和素的氨基基团发生亲核取代反应,生成稳定的酰胺键。在缓冲条件、pH值及反应温度适宜的情况下,偶联效率较高。偶联后,通过透析或凝胶过滤去除游离染料,保证结合物的纯度和功能完整性。偶联后的链霉亲和素仍保持其四聚体结构及高亲和生物素结合能力,同时获得可检测的荧光信号。
应用范围
链霉亲和素-CF633结合物在生物医学及分子检测中用途广泛:
生物素标记系统检测:与生物素化*体、核酸或其他分子结合,形成间接标记体系,用于免疫荧光、原位杂交(FISH)等实验。
多重标记:红色荧光特点与其他荧光染料形成互补,可进行多色共定位研究。
流式细胞术:作为二级检测试剂,将生物素标记的初级*体与链霉亲和素-CF633结合,实现高灵敏信号检测。
分子成像:用于组织切片或活体成像实验,追踪生物分子分布。
高通量检测平台:在ELISA、蛋白芯片等多种平台中,链霉亲和素-CF633结合物可作为高灵敏荧光信号提供者。



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