AF555标记小麦胚芽凝集素
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结构特点
AF555标记小麦胚芽凝集素(Wheat Germ Agglutinin, WGA)是一种由小麦胚芽提取得到的多糖结合型蛋白,通过氨基反应共价偶联了 Alexa Fluor 555(AF555)荧光染料。其分子结构可分为:
WGA 蛋白核心:具有特异性结合 N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)及唾液酸残基的能力,可用于识别细胞膜和糖链结构。
AF555 荧光染料:属于红色荧光染料,吸收峰约为555 nm,发射峰约为565 nm,具有高光稳定性和亮度。
共价连接方式:通常通过 WGA 上的赖氨酸氨基与 AF555 的活性酯形成稳定的酰胺键,使染料牢固结合蛋白而不影响其糖识别能力。
化学性质
AF555-WGA 保留了 WGA 的特异性糖结合能力,同时具备荧光标记功能。染料在生理条件下稳定,荧光信号清晰,可用于显微成像及流式分析。标记过程中通过适当摩尔比控制荧光强度,避免过量修饰导致蛋白活性下降。
应用领域
细胞膜和糖链研究:可用于可视化细胞表面糖链分布,识别特定的多糖结构,如神经元表面唾液酸。
荧光显微成像:适用于共聚焦显微镜、荧光显微镜及超分辨率成像,显示细胞膜、内质网或胞外基质的糖基分布。
细胞追踪与活体成像:由于 AF555 发射红色荧光,背景干扰低,可用于活细胞染色和动态观察。
病理和组织学研究:在组织切片中用于糖基定位和结构分析,帮助理解细胞间相互作用和信号传递。



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