在现代分子生物学和蛋白质研究中,荧光标记是观察分子动态、蛋白质分布及分子相互作用的重要工具。Cyanine5-Sulfo-NHS 是一种水溶性红光荧光染料,其结合了高亮度荧光特性和氨基活性官能团,为蛋白质标记、抗体偶联以及多通道成像实验提供了可靠手段。
Cyanine5-Sulfo-NHS 的基本特性
Cyanine5 属于 cyanine 系列红光荧光染料,激发波长约为 650 nm,发射波长约为 670 nm,发射红光,具有较低的细胞自发荧光干扰和良好的光稳定性,可用于体外蛋白标记以及活细胞成像。Sulfo-NHS(磺基 N-羟基琥珀酰亚胺酯)是其活性化学基团,能与蛋白质或多肽中的氨基(–NH₂)形成稳定共价键,实现高效标记。Sulfo 修饰提高了染料水溶性,使其在水性缓冲液中易于溶解和操作,减少疏水性聚集。
主要应用
蛋白质与抗体标记
Cyanine5-Sulfo-NHS 可与蛋白质中的赖氨酸残基偶联,广泛应用于抗体标记和荧光免疫分析。通过标记抗体,可实现特定蛋白在细胞或组织中的定位观察。多通道荧光实验
Cyanine5 的红光发射波段与绿光或蓝光荧光染料兼容,可在同一样品中实现多分子同步观察,提高实验信息量。活细胞及体外实验
水溶性和光稳定特性使 Cyanine5-Sulfo-NHS 适用于体外蛋白标记、ELISA 实验及活细胞成像,获得稳定清晰的荧光信号。
实验注意事项
反应条件:NHS 酯对水敏感,偶联反应通常在 pH 7–9 的缓冲液中进行,以保证标记效率。
溶解与储存:通常先溶解于 DMSO,再稀释到缓冲液中使用;低温避光储存可保持染料活性。
标记比例控制:过量染料可能影响蛋白质结构和功能,需要优化染料与蛋白质的比例。
科研价值
Cyanine5-Sulfo-NHS 结合红光荧光特性与 Sulfo-NHS 官能团,为蛋白标记、抗体偶联及多通道成像提供可靠工具。它能够实现蛋白定位、分子追踪及分子互作分析,为细胞生物学、蛋白质研究和免疫学实验提供直观可视化手段。



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