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普鲁士蓝染色液的三种染色方法及注意事项
发布时间:2020-07-22     作者:axc   分享到:

普鲁士蓝染料剂液的六种染料剂手段及要留意重大事项

普鲁士蓝不起作用(Prussianblue reaction)又名为含钙量血黄素复染,即所经亚铁化钾和稀酸操作后也可以制造黄色,典型于主宰肿瘤细胞或间质内,转化一个不溶解性的绿色氧化物即三 价铁的亚铁化物。普鲁士蓝着色液重点采用展示肿瘤细胞中铁化合物,典型于充斥細胞内,会较好地划分含铜血黄素与其余色素沉着。该固色液可靠性好、会长期的保管、不可会产生放置、技术应用的范围广, 不错通过复染。

普鲁士蓝染色液的三种染色方法及注意事项 

普鲁士蓝内部染料

备用的材料:

1、固定液:10%中性福尔马林、4%多聚甲醛等。

2、系列表乙酸乙酯

普鲁士蓝分为三类染色剂类种及配制工艺

印染类别

备制方案

石蜡切块复染

1、组织固定于10%中性福尔马林,常规脱水包埋。
2、切片厚度4μm,常规脱蜡至水。
3、蒸馏水水洗 1min。
4、切片入Perls stain(见注意事项2),浸染15~30min。
5、蒸馏水充分冲洗2~5min。
6、入核固红染色液,淡染细胞核5~10min。
7、自来水冲洗1~5s。
8、常规脱水透明,中性树胶封固

急冻切块印染

1、无需脱蜡,直接迅速用蒸馏水冲洗2~3min。
2、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤,时间可以相应缩短。

内部印染

1、4%多聚甲醛固定10~20min。
2、自来水冲洗2次,每次2min。
3、蒸馏水冲洗2次,每次2min。
4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤,时间可以相应缩短

普鲁士蓝着色主意特别注意:

1、切片脱蜡应尽量干净。组织固定常采用10%中性福尔马林,经普通福尔马林长期固定后,组织会有损伤。避免使用酸性固定剂,铬酸盐处理也会妨碍铁的保存。

2、整个操作过程中容器要干净,避免用金属铁制品,洗切片和容器时以蒸馏水为宜,因普通水内含铁质。Perls stain 染色时,应根据样本情况调整着色时间。

3、所有切片都应使用同一个阳性对照切片,选择适合的对照非常重要。尸检肺组织是一个很好的对照,包含相当数量的铁阳性巨噬细胞(心衰细胞)。

4、冷冻切块和細胞复染,不同重要原因深入研究实验操作必要条件。

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