各称：1M 冰醋酸锂硫酸铜溶液/乙酸锂稀硫酸

英文版名:1M Lithium Acetate solution

描绘：pg电子娱乐游戏app 创始的**鲜酵母粉和转化率了微生物培养基盒注意于酿酒鲜酵母粉质粒和转化率了实验性，该微生物培养基盒应遵循广大青年用户名的运行生活方式，分开供应PEG、LiAc和Carrier DNA饱和溶液，PEG、LiAc均要经过除去菌，Carrier DNA经特定网站优化正确处理，更能够提生质粒DNA的导出转化率。该化学试剂盒可依照具体情况需用便捷标定1 × LiAc悬浊液和转变成预混液，既便动用，又经济增长好点。

感语态组织细胞提纯：

1.滋养枯草芽孢杆菌。-80 ℃储存的茵种在YPDA养育基扁平上划线，30 ℃培养教育2-4天。

2.挑取酵母菌单菌落在YPDA培养出基uv上划3-5 mm的中短线，30 ℃提升2-4天。

3.待酒曲单菌落长至厚度2 mm时，把酒曲人体细胞疫苗注射到3 mL YPDA液态塑造微生物培养基中，30 ℃過夜培养出。

4.**天电话转接到含带30-50 mL YPDA液状体训练基的半圆瓶中已经训练，待OD600做到0.4-0.5，3000 rpm离心力5 min，弃上清。

5.悠长岁月中用30-50 mL的无茵的去铝离子水浮动。3000 rpm离心力5 min，弃上清。

6.悠长岁月中用1.5 mL 1 × LiAc（150 μL 10 × LiAc Solution加1350 μL灭菌水）重悬后转让至1.5 mL抽滤管上，3000 rpm离心式5 min，弃上清。

还要注意：10 × LiAc Solution pH响应，暂时无法增长TE看作降低剂。

7.加盟1 mL 1 × LiAc重悬，小体积计算导出决定每管100 μL预包装，使用于文库转为不预包装。

8.3000 rpm离心分离5 min，弃上清，感想态体细胞即制得立即。

要注意：配制好的感想怎么写态**实时适用，在第8步抽滤前，温度放应为不低于5天。

还原成预混液配成：

酵母菌质粒转成：

1.将360 μL预混液加入到1支大量态组织中，一直吹吸结晶，使发酵粉组织齐全悬浮按钮于预混液中。

2.30 ℃的水浴锅中孵育30 min，每10 min混匀一起。

3.（假如20 μL DMSO，供选择）42 ℃的水浴锅中热击30 min，每10 min混匀以此。

4.12000 rpm离心分离15 s，弃上清液。

5.（可选择方法步骤）用1 mL YPD Plus Liquid Medium再飘浮，30℃摇床振荡培养计划30-60 min。12000 rpm抽滤15 s，弃上清液。

6.参加0.1-1 mL没有细菌去正离子水或0.9%氯化钠盐溶液重悬沉淀物，涂筛分教育培养基的配制uv，30 ℃塑造培养2-4天。

酒曲文库变为：（需要15-50 mL离心力管）

1. 将2520 μL预混液注入到知道态组织（未灌装）结晶中，股票震荡使知道态组织完全重悬。

2. 放入在30 ℃的水浴锅中孵育50 min，每10 min混匀以此。

3.（成为160 μL DMSO，先选）平放在42 ℃的水浴锅中热击30 min，每10 min混匀第一次。

4. 3000 rpm抽滤5 min，弃上清液。

5.（先选步）用3 mL YPD Plus Liquid Medium重悬沉淀物，30 ℃摇床股票震荡培训90 min，3000 rpm离心式5min，弃上清液。

6.假如15 mL没有细菌去亚铁离子水或0.9% 氯化钠盐溶液重悬菌体，涂建立提升基平面（50个安卓平板左右两），30 ℃陪养2-4天。

主意地方：

1.导出整个过程需无茵的操作。

2.第一，操作Carrier DNA，请把放有Carrier DNA的吸管在开水中高温5 min，最后当即放冰上运动，用后-20℃吸收自备。以后施用前在冰上运动化冻Carrier DNA。不间断冻融3-5次后需完后退行Carrier DNA。

3.PEG液体在高低温环镜下易进行析出，请于超低温环镜下截然溶化后安全使用。

4. 结合质粒溶液浓度值增减体积大小，增强酵母粉质粒的溶解度和溶液浓度值行延长转成效应。

制造好产品索引：

EMMG培养基（含谷氨酸钠） 2×500ml

EMMS培养基（含山梨醇） 2×500ml

EMM培养基（钙镁糖提供无菌母液） 10×0.5L

EMM培养基（过滤除菌） 2×500ml

EMM培养基（需过滤除菌） 10×0.5L

SDC液体培养基(酵母衰老实验) 2×500mL

YE Agar Medium 10×0.5L

YE Medium 10×0.5L

YEP Agar Medium 10×0.5L

YEP Medium 10×0.5L

YEPM Agar Medium/YPM Agar Medium 10×0.5L

YEPM Medium/YPM Medium 10×0.5L

YES Agar Medium 10×0.5L

YES Medium 10×0.5L

YPDS Liquid Medium 100mL

YPS Agar Medium/YEPS Agar Medium 10×0.1L

YPS Medium/YEPS Medium 10×0.1L

低糖EMM培养基 2×500ml

酵母MM培养基/无机盐培养基（2×） 2×500ml

缺磷EMM培养基 2×500ml

无糖EMM培养基 2×500ml

pGBKT7 DNA-BD Vector 酵母双杂交克隆载体 20μl

pGBKT7-53 Vector 酵母双杂交对照载体 20μl

pGBKT7-Lam Vector  酵母双杂交对照载体 20μl

pGADT7-AD Vector 酵母双杂交克隆载体 20μl

pGADT7-T Vector 酵母双杂交对照载体 20μl

pBridge Vector 酵母三杂交克隆载体 20μl

pGBT9 Vector 酵母双杂交克隆载体 20μl

Y2HGold Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 300μl

Y2HGold Chemically Competent Cell  酵母菌化学感受态细胞 100μl

Y187 Yeast Strain  酵母双杂交用甘油菌 300μl

Y187 Chemically Competent Cell  酵母菌化学感受态细胞 100μl

yyp2021.2.22