荧光标记胆固醇衍生物定制技术-西安pg电子娱乐游戏app
生物
荧光标记胆固醇衍生物定制技术
一、概述
蛋白质是类固醇脂质的主要代表英文,范围广加入生物体膜勾勒、脂质体系中统和类脂体肿瘤药物传导中。将蛋白质实施荧光标上(如FITC、Rhodamine、Cy5等),可以用在于神经细胞动态的成相、蛋白质细胞代谢定位跟踪、纳米技术膜蛋白表现研发等。二、定制合成技术流程
1. 胆固醇衍生物设计
常用的可图标低密度胆固醇发展物还包括:蛋白质-羧酸(Chol-COOH)胆固-氨基(Chol-NH₂)甘油三酯-羟基(Chol-OH)当中Chol-NH₂ 和 Chol-COOH 是荧光偶联的理想的前体。2. 选择荧光染料及官能团
可用荧光符号物基本生理反应基团:FITC(异硫氰酸荧光素) → 作用氨基NHS-Cy5/Cy3 → 酰胺键连接方式氨基Rhodamine B Isothiocyanate → 与氨基的反应Fluorescein-NHS ester → 与热量-氨基共轭3. 偶联反应过程
溶液:DMSO、DMF、乙腈加载液:碳酸盐加载液(pH 8.0–9.0)环境温度:常温或4°C,遮光拌和 12–24 h摩尔比:高密度脂蛋白:荧光基团 = 1:1.2(推荐 应适当过多荧光染剂)4. 纯化与表征
TLC或HPLC使用在消除未症状荧光素质谱、NMR、UV-Vis、荧光光谱图去结构类型和性能指标明确三、应用示例
甘油三酯轉運示踪实验报告(组织膜摄取量)脂质体中甘油三酯情况学习蛋白质呈现nm粒追查产品定位四、常用试剂推荐
| 名字大全 | 种类 |
| FITC、NHS-Cy5 | 荧光标示剂 |
| Cholesterol-NH₂、Chol-COOH | 标识前体 |
| DMSO、碳酸盐降低液 | 容剂系統 |
| Sephadex G25柱 | 脱盐纯化 |

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