KLH偶联多肽定制技术

KLH（Keyhole Limpet Hemocyanin，钥孔鱼血蓝蛋白） 是一种高免疫原性的大分子蛋白，常作为多肽抗原载体应用于疫苗研发、抗体制备及免疫分析。通过将小分子肽段共价偶联至KLH上，可大幅提高其免疫原性，诱导机体产生特异性免疫应答。

1. 常用偶联策略

a. EDC/NHS缩合不起作用（胺-羧酸）灵活运用多肽上的氨基与KLH淀粉酶上的羧基反應；较常用于带有赖氨酸残基或N终端胺的肽。b. 巯基-马来酰亚胺法多肽导入C末半胱氨酸（Cys），与马来酰亚胺表达的KLH响应；特情人高，构造动态平衡，不引响KLH主链系统。c. Click发应（少使用于KLH，偶联错误率高但需发应生活条件提高）；

2. KLH类型与处理

原始KLH（Native KLH）：少用于免疫系统實驗；KLH平台化掩盖型：如Succinylated-KLH、Maleimide-KLH；一样 先产甲烷KLH，多加入肽段做好定向招生偶联；来完成后进行透析或离心力超滤膜我们要除游离子肽段。

3. 定制流程

聚合含C互联网-Cys的肽段或赖氨酸多肽；在使用Sulfo-SMCC等热塑剂将KLH来马来酰亚胺化；对其进行偶联反馈（和缓状况，4℃闭光）；透析纯化，HPLC或PAGE校验偶联转化率；可展示 偶联率（短路电流规格）的检测汇报。

4. 应用方向

抗原分离纯化：如多肽抗原分离纯化多克隆抗原（pAb）或单抗；狂犬肺炎疫苗制作：如肉瘤新抗原肽-KLH狂犬肺炎疫苗；抗体查测条件物：偶联肽广泛用于ELISA包被抗原。

5. 定制选项

KLH媒介选用：Native KLH / Maleimide-KLH；偶联硬度把控好（低/中/高）；支撑与OVA/BSA比对偶联；可此外能提供肽-HSA、肽-BSA等多膜蛋白型号。

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