FITC、BODIPY、Cy5-依鲁替尼(Ibrutinib)的荧光探针技术
依鲁替尼(Ibrutinib)的荧光探针技术
1. 荧光标记设计逻辑
依鲁替尼作为BTK不可逆抑制剂,常用于设计FRET探针、NanoBRET探针或荧光蛋白偶联探索作用机制:
FRET检测器:依鲁替尼被连入荧光供体(如FITC、BODIPY)和多巴胺受体(Cy5)达到荧光电能转换。在BTK依照位点打断FRET改变,用于精确测量判断力 。NanoBRET测试探针:将依鲁替尼与NanoLuciferase可相鄰临近BTK,探测警报制造 。2. 合成与标记方式
标记图片地址取舍:依鲁替尼原子核含硫醇靶点Cys481位点,变革范围位点(如苯氧基苯甲酸空间结构)常用于接通荧光商品标签而不危害可溶性 。偶联化学:
引用短聚乙二醇(PEG)或烷基linker,在终端接NHS酯纺织染料(如BODIPY-FL、Cy3、FITC)。的对比要用click电学,将Azide-依鲁替尼与Alkyne-荧光染剂对接。3. 实验方法和注意
体内联系科学试验:用FRET/NanoBRET联系BTK 纯天然型vs 变异体(如L528W)相对联系吸引力 。组织内靶向疗法证实:荧光电极与BTK共分析科学试验,依照Western blot、活体荧光显像。安全性考核:热安全定量分析、光固色测试仪等。用途:仅应用于科研,不能用于人体实验!
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