AF 350 NHS的偶联机制与反应条件
AF350 NHS Ester,即 Alexa Fluor 350 N-羟基琥珀酰亚胺酯,是一种高性能的紫外-蓝色荧光染料活性酯,属于Thermo Fisher Scientific Alexa Fluor系列。它结合了Alexa Fluor 350染料的优异光学性能与NHS酯的化学活性,广泛应用于蛋白质、多肽、核酸等生物大分子的共价荧光标记。
该纺织染料其为激活光波光波波长较短,试射在颜色荧光地区,比较合适于多色荧光浅析中“短光波光波波长入口”的记号消费需求。其高量子产出率和光稳判定性,使其在高敏锐度的荧光查测和显微三维成像中展现非常好。偶联规则与反應的条件AF350 NHS Ester经由NHS几丁质酶酯基团与生物体大脂溶性(淀粉酶质、肽、免疫抗体、核酸等)中的伯胺基团发生亲核转化成现象,生成维持的共价酰胺键,改变符号。反应迟钝环境:缓冲器液pH一半为7.4至8.5,合适为8.0作用的反应高温环境温度或4°C阴凉实现,避免光脱色的反应期限:一样 30分到1小時注意议题议题:减少氧化钙含量氨基和含水分太多,解决办法NHS酯水解反应大幅度降低偶联生产率蛋白质标记与分析
AF350 NHS Ester用于标记蛋白质和抗体,帮助研究者进行免疫荧光染色、Western blot检测、免疫沉淀和蛋白质定位等研究。
流式细胞术
作为紫外激发荧光染料,AF350可用于流式细胞仪的紫外激光通道,多色多参数分析中“蓝紫通道”的荧光标记。
荧光显微成像
适合细胞及组织样本的共聚焦显微镜、超分辨率显微镜等,尤其适合与其他Alexa Fluor染料搭配进行多色荧光共定位实验。
核酸及寡核苷酸标记
通过偶联含氨基修饰的寡核苷酸,制备高灵敏度的FISH探针和PCR荧光探针。
生物传感器与动力学研究
可结合酶、受体等生物分子,制备荧光传感器,实现动力学及相互作用研究。