产品名称:Fluorescein-PEG4-NHS ester
品牌简洁:Fluorescein-PEG4-NHS Ester 是一种将绿色荧光染料荧光素(Fluorescein, FITC 类似)与 N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS Ester)通过四个单位的聚乙二醇(PEG4)连接的活性酯衍生物。PEG4 链为荧光染料与目标分子之间提供柔性连接和水溶性改善,而 NHS 酯活性基团使其能够在温和条件下与蛋白质、肽或其他含氨基的生物分子高效共价偶联,从而实现标记、追踪和功能分析。
化学结构与性质
荧光素核心:提供绿色荧光(激发约 490 nm,发射约 520 nm),亮度高,光稳定性良好。
PEG4 链:短聚乙二醇链增加水溶性与空间柔性,减少标记对目标分子功能的干扰。
NHS 酯活性基团:可与蛋白质或肽的赖氨酸残基氨基形成稳定的酰胺键,实现共价标记。
水溶性与反应性:偶联产物在缓冲液体系中稳定,适合在生物条件下使用。
功能特点
绿色荧光信号:荧光素发射峰位于 520 nm,可用于共聚焦显微镜、流式细胞分析和多色实验。
温和共价标记:NHS 酯可在 pH 7–9 缓冲液中快速与氨基结合,标记效率高且不破坏蛋白或细胞结构。
PEG4 空间缓冲:柔性 PEG 链降低标记对分子结构和功能的影响,减少非特异性结合。
光学稳定性良好:适合长时间成像和定量分析。
应用领域
蛋白质与肽标记:用于制备绿色荧光探针,实现生物分子追踪、定位和定量分析。
活细胞成像:绿色荧光信号适合多色成像,可与红光或远红光染料组合。
流式细胞分析:用于检测蛋白表达、受体分布及细胞表面标记。
功能性探针构建:PEG4 提供灵活连接,可用于药物、受体配体或小分子探针的标记。
使用与注意事项
溶解与反应条件:通常先溶解于干燥有机溶剂(DMSO 或 DMF),再加入缓冲体系进行标记。
储存:避光、低温(−20℃)干燥保存,防止光降解。
标记优化:需根据蛋白浓度和 NHS Ester 摩尔比调整,以获得高效标记。
非特异性结合:PEG 链可减少非特异性吸附,但仍需优化洗涤条件。